呕吐毒素检测原理
检测基于抗原抗体反应。检测板上预包被呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)偶联抗原,加入校准品/样本、酶标试剂以及抗体工作液后,校准品/样本中的呕吐毒素 同检测板上预包被的抗原竞争抗体上的抗原结合位点。检测板上抗原结合的抗体量与校准品/样本中 呕吐毒素 浓度呈负相关。经 TMB 底物显色,样本吸光值与其呕吐毒素的含量呈负相关,与标准曲线比较即可得出样本中呕吐毒素的含量。
呕吐毒素检测样本类型
饲料原料及成品饲料。特殊样本基质可能对检测造成影响,如需开发他前处理方法请致电我们。
呕吐毒素检测试剂盒技术参数
检测范围:250ppb~5000ppb
反应温度:25℃
反应时间:20min
呕吐毒素试剂盒组成
呕吐毒素稀释液:50ml*2 瓶
呕吐毒素检测板:96T
呕吐毒素校准品:1.5mL*5 支
呕吐毒素抗体工作液:8mL
呕吐毒素酶标试剂:8mL
显色液:15mL
终止液:15mL
盖板膜 2 张、
质检报告 1 份、
说明书 1 份
校准品 1~5 浓度分别为:0ppb、250ppb、1000ppb、2000ppb、5000ppb。
(1ppb=1ng/mL=1ng/g=1μ g/kg)(注:样本在前处理过程中稀释了 50 倍,校准品实际浓度为设定浓度的 1/50,计算原始样本浓度时无需换算。)
呕吐毒素检测所需材料(不提供)
酶标仪(450、630nm 滤光片)、天平(感量 0.01g)、粉碎机、振荡器、离心机、洗板机/洗瓶、单、多道移液器及枪头(单道 10~100μL、20~200μL、多道 30~300μL)、量筒、有盖的玻璃容器、离心管、加样槽、吸水纸、计时器、甲醇(分析纯)、蒸馏水
呕吐毒素检测简易操作步骤
1. 提取:样本按 1:5(w:v)的比例加 70%甲醇,震荡提取 3min,4000rpm离心 5min。
2. 稀释:取上清液 100μL 加 900μL 呕吐毒素稀释液,混匀待检。
3. 加样:向检测板中依次加入呕吐毒素校准品/待测样本 50μL、呕吐毒素酶标试剂50μL、呕吐毒素抗体工作液 50μL,25℃孵育 15min。
4. 洗板:蒸馏水洗板 4 次,拍干。
5. 显色:加显色液 100μL/孔,25℃避光孵育 5min。
6. 终止:加终止液 100μL 孔,酶标仪读数。
7. 计算:数据带入计算软件。
贮藏方法及有效期
2~8℃干燥保存,有效期 12 个月